蛍光顕微鏡の種類
ログイン落射蛍光顕微鏡は、輝きと同じ光学系を介して光を集めます。
これまででは最も一般的な蛍光顕微鏡は、落射蛍光構成です。落射蛍光顕微鏡では、光源 - 典型的には、水銀やキセノンランプは - 波長の狭い領域を選択するフィルタを介して輝いています。フィルタリングされた光は、顕微鏡対物レンズを通して試料上に輝いています。彼らは、より短い波長の光を吸収したときに長波長の光を放出する分子標識 - 入射光は、フルオロフォアによって吸収されます。フルオロフォアからの光は、照明光源からの散乱光と共に、対物レンズに、検出器または眼に戻ります。照明光アウト道に沿って、別のフィルタをブロックするので、残っているすべては、試料からの蛍光である。
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共焦点
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落射蛍光顕微鏡からの光を集光しますどこでも顕微鏡の視野内。励起光の一部は、顕微鏡の焦点面を超えて焦点面でいくつかの、いくつかの焦点面の前に吸収されます。顕微鏡は、すべての光を収集しているため、画像が焦点に光の鋭い映像が含まれていますが、それはまた、他の地域からピンボケ光を持つことになります。共焦点顕微鏡は、同一平面上にレーザスポットを集中することで、顕微鏡がフォーカスされることが修正されます。そして、ピンホールは、顕微鏡の焦点から来ていないことをすべてブロックし、光検出器の前に行きます。サンプルを走査することにより、オブジェクトのクリーン三次元画像を得ることができる。で
多光子
ログインした光は、試料内の分子から来る蛍光顕微鏡で。
共焦点顕微鏡では位置合わせが非常に敏感です。レーザスポット、顕微鏡の対物レンズ場合は、収集光学系と、ピンホールは、顕微鏡パフォーマンスが低下少しでもオフになっています。多光子顕微鏡は半分だけ、それが試料中のフルオロフォアを励起することが必要であるとして精力的なレーザー波長を使用することによって、この問題を回避し得ます。光子 - - 非常に短い時間で蛍光団に当たるレーザ光は、光の2つの粒子は、そのように十分に明るい場合にフルオロフォアが興奮すると蛍光を放出する唯一の方法です。つまり、レーザーは非常に小さなスポットに集束されている場合にのみ発生します。だから、光を放出する、試料中の唯一の場所は、レーザーを取り除くために余分な背景光はありませんので、いいとクリーンなイメージを保持している、フォーカスされされる - 整列するピンホールがないことを意味する
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全内部反射蛍光（TIRF）
ログイン単一のサンプルは、複数の蛍光団を持つことができます。
非常にきれいな画像を得るための別の方法は、励起光を試料に非常に遠く取得していないことを確認することです。ニューロンのブロブは、例えば、ガラススライド上に溶液の液滴に配置されている場合には、ニューロンの一部がガラス表面に付着します。それは本当に、細胞を保持する溶液中にそれをしないように全内部反射蛍光（TIRF）顕微鏡では、光はガラススライドに横向きに向けられています。ガラスの表面にちょうど非常に近い - しかし、光の一部がかろうじて溶液中にリークします。これは右にガラス面に対して非常に薄い領域になり、光を放出するだけの場所を意味します。そんなに面白いものは細胞の表面上で起こる場合に神経細胞のようなものについては、この技術は非常に有効であることができる
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超解像
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すべての顕微鏡。 - 蛍光顕微鏡を含む - 光の伝搬を支配する物理学によって制限されています。と小さくない - 基本的なルールの一つは、光の集光スポットは、だけなので、小さな得ることができるということです。可視光については、その大きさは約200ナノメートル、またはメートルの1000000000分の200です。しかし、単一の分子のサイズはわずか数ナノメートルであるため、回折限界と呼ばれるそのサイズの制限の下にある興味深い機能の多くは、あります。科学者たちは、その制限を回避潜入する「超解像」技術を開発しています。構造化照明顕微鏡（SIM）と誘導放出の枯渇は、（STED）顕微鏡法は、例えば、励起光のスポットの大きさを縮小することにより、発光スポットの大きさを制限し、両方の蛍光顕微鏡検査法である。
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